ELISA檢測試劑盒的三種檢測方法
1. 雙抗體夾心法(Sandwich ELISA)
原理:該方法使用兩個抗體,一個作為捕獲抗體固定在微孔板上,另一個作為檢測抗體帶有酶標記。樣本中的目標抗原被捕獲抗體固定后,檢測抗體與抗原結合,通過酶的底物反應產(chǎn)生可檢測的信號。
操作流程:樣本加入微孔板,與預包被的捕獲抗體結合;加入酶標記的檢測抗體,與已結合的抗原結合;加入底物,產(chǎn)生顏色變化,通過顏色深淺定量分析抗原含量。
2. 競爭法(Competitive ELISA)
原理:競爭法中,樣本中的目標抗原與已知濃度的抗原競爭結合有限數(shù)量的抗體。樣本中抗原含量越高,結合到抗體上的標記抗原就越少,產(chǎn)生的信號也就越弱。
操作流程:將樣本和已標記的抗原同時加入含有抗體的微孔板中,讓它們競爭結合抗體;洗去未結合的成分后,加入底物,通過顏色變化來定量分析樣本中的抗原含量。
3. 間接法(Indirect ELISA)
原理:間接法首先使用未標記的抗體與樣本中的抗原結合,然后加入酶標記的二抗(抗抗體)來識別并結合到一抗上。通過酶的底物反應產(chǎn)生信號,間接檢測目標抗原。
操作流程:樣本加入微孔板,抗原與板上的抗體結合;加入酶標記的二抗,與一抗結合;加入底物,產(chǎn)生顏色變化,通過顏色深淺定量分析抗原含量。
以上三種方法是ELISA檢測試劑盒中常見的檢測技術,每種方法都有其特定的應用場景和優(yōu)勢。選擇哪種方法取決于檢測的目的、樣本類型以及所需的靈敏度和特異性。