聚蔗糖泛影葡胺現(xiàn)貨供應(yīng)
上海信帆生物供應(yīng)聚蔗糖泛影葡胺,產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,庫(kù)存充足,深受廣大科研用戶青睞。
密度:1.077g/cm3
聚蔗糖泛影葡胺是一種無菌的,用于提純少量或大量人外周血中高產(chǎn)和高純度的淋巴細(xì)胞的即用型密度梯度介質(zhì)?;贐oyum發(fā)展方法中的一簡(jiǎn)單快速的離心操作來完成純化過程。Ficoll Plus 1.077也可以用來制備除人外周血其他來源的淋巴細(xì)胞。
Ficoll分層液法原理簡(jiǎn)介
主要用于分離外周血中的單個(gè)核細(xì)胞,是一種單次密度梯度離心分離法。聚蔗糖-泛影葡胺是一種較理想的細(xì)胞分層液,其主要成分是一種合成的蔗糖聚合物稱聚蔗糖(商品名為Ficoll),分子量為40kD,具有高密度、低滲透壓、無毒性的特點(diǎn)。
高濃度的Ficoll溶液粘性高,易使細(xì)胞聚集,故通常使用60g/L的低濃度溶液,密度為1.020,添加比重為1.200的泛影葡胺(urografin)以增加密度。國(guó)外常用商品Isopaque或Hypaque,故又稱Ficoll-Hypaque分層液,將適量340g/L泛影葡胺加入Ficoll溶液中即可配制成密度合適分層液。分離人外周淋巴細(xì)胞以密度為1.077±0.001的分層液最佳,因?yàn)槿说募t細(xì)胞密度為1.093,粒細(xì)胞密度為1.092,單個(gè)核細(xì)胞在1.076~1.090之間。
而不同動(dòng)物血中的單個(gè)核細(xì)胞對(duì)分離液的密度要求各不相同,如小鼠為1.088,馬為1.090。分離時(shí)先將分層液置試管底層,然后將肝素化全血以Hanks液或PBS液作適當(dāng)稀釋后,輕輕疊加在分層液上面,使兩者形成一個(gè)清晰的界面。水平式離心后,離心管中會(huì)出現(xiàn)幾個(gè)不同層次的液體和細(xì)胞帶。紅細(xì)胞和粒細(xì)胞密度大于分層液,同時(shí)因紅細(xì)胞遇到Ficoll而凝集成串錢狀而沉積于管底。血小板則因密度小而懸浮于血漿中,唯有與分層液密度相當(dāng)?shù)膯蝹€(gè)核細(xì)胞密集在血漿層和分層液的界面中,呈白膜狀,吸取該層細(xì)胞遞經(jīng)洗滌高心重懸。本法分離單個(gè)核細(xì)胞純度可達(dá)95%,淋巴細(xì)胞約占90%~95%,細(xì)胞獲得率可達(dá)80%以上,其高低與室溫有關(guān),超過25℃時(shí)會(huì)影響細(xì)胞獲得率。
聚蔗糖泛影葡胺現(xiàn)貨供應(yīng)